SF6016 - Évaluation de trousses de dosage immunologique ayant une sensibilité et une spécificité élevées pour la détection rapide de E. coli O157:H7 dans les aliments

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Chercheur :

Joseph Odumeru, PhD, Division des services de laboratoire, Université de Guelph

Objectifs :

1. Évaluer la trousse de détection Immunocard STAT! E. coli O157:H7 (Meridian Diagnostics) pour la détection de E. coli O157:H7 dans diverses denrées alimentaires (bœuf haché cru, lait, cidre, germes de luzerne et fromage).
2. Établir un protocole de dépistage de E. coli O157:H7 à l’aide de la trousse de détection ci‑dessus par l’étude de l’emploi d’une technologie de séparation immunomagnétique et d’agars commerciaux sélectifs pour l’isolement rapide de E. coli O157:H7 à partir d’échantillons peu contaminés.

Avantages prévus :

1. Si des essais permettaient une détection spécifique de E. coli O157:H7 en moins de 24 heures, cela permettrait d’accélérer la transmission des résultats et de réduire le nombre de faux positifs et d’identifications erronées, la haute sensibilité de la détection étant conservée.

Sommaire des résultats de recherche :

Cette étude porte sur une trousse commerciale de détection par essai immunologique (Immunocard STAT! E. coli O157:H7, Meridian Diagnostics), dont on a signalé la spécificité accrue pour la détection de Escherichia coli O157:H7; nous avons évalué son rendement pour la détection de E. coli entérohémorragique (EHEC) O157 dans diverses matrices alimentaires, et nous l’avons comparée avec d’autres trousses de détection commerciales : Eclipse E. Coli O157:H7 (Eichrom Technologies Inc.), RapidChek E. Coli O157 (Strategic Diagnostics Inc.) et Reveal E. coli O157 (Neogen Inc.). Lors de tests effectués sur 70 cultures pures (19 de E. coli O157:H7, types de bactériophages fréquemment liés à des flambées d’origine alimentaire, 3 de E. coli O157 non H7, 11 d’autres souches de E. coli non O157 et 37 de souches non E. coli de 17 genres), les quatre trousses avaient une sensibilité de 100 % pour la détection de EHEC O157. La spécificité a été évaluée à 94,2 % pour Immunocard STAT! O157:H7 et à 88,4 % pour les autres trousses. Les limites de détection ont été évaluées à 104 - 105 UFC/mL pour les trousses de test Reveal O157 et RapidChek O157, à 105 - 106 UFC/mL pour Immunocard STAT! O157:H7 et à 106 - 107 UFC/mL pour Eclipse O157:H7. Les tests d’inoculation de souches de E. coli O157:H7 résistantes à l’acide nalidixique dans diverses matrices alimentaires (bœuf haché, cidre de pommes non pasteurisé, germes de luzerne et fromage) ont permis de montrer qu’après enrichissement, il était possible de détecter moins d’une cellule de E. coli O157:H7 par gramme ou par millilitre d’échantillon. On a obtenu des taux de détection de 100 % lorsque les échantillons étaient enrichis dans un bouillon EC avec un supplément de 20 mg/L de novobiocine à 36 ± 1 oC. La présente étude montre donc que la trousse de détection STAT! O157:H7 convient aux fins du prédépistage de EHEC O157 présent en faible quantité dans les aliments. On recommande de soumettre les échantillons pour lesquels l’essai est positif à une confirmation par des méthodes de culture permettant une caractérisation plus poussée.